የሄሞግሎቢን ኤሌክትሮፊዮርስስ ሙከራ

የሙከራ መርህ

ሄሞግሎቢን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ዓላማው የተለያዩ መደበኛ እና ያልተለመዱ ሄሞግሎቢኖችን ለመለየት እና ለማረጋገጥ ነው።

በተለያዩ የሂሞግሎቢን ዓይነቶች የተለያዩ ክፍያዎች እና isoelectric ነጥቦች ምክንያት, በተወሰነ ፒኤች ቋት መፍትሄ ውስጥ, ሂሞግሎቢን ያለውን isoelectric ነጥብ ቋት መፍትሔ ፒኤች ያነሰ ጊዜ, ሂሞግሎቢን አሉታዊ ክፍያ ተሸክሞ electrophoresis ወቅት anode ወደ ይፈልሳል. በተቃራኒው, አዎንታዊ ክፍያ ያለው ሄሞግሎቢን ወደ ካቶድ ይንቀሳቀሳል.

በተወሰነ የቮልቴጅ እና ከተወሰነ ኤሌክትሮፊዮራይዝ ጊዜ በኋላ, የተለያዩ ክፍያዎች እና ሞለኪውላዊ ክብደት ያላቸው ሄሞግሎቢኖች የተለያዩ የፍልሰት አቅጣጫዎችን እና ፍጥነቶችን ያሳያሉ. ይህም የተለያዩ የሂሞግሎቢኖችን መጠን ለመለካት የተለያዩ ዞኖችን ለመለየት ያስችላል። በብዛት ጥቅም ላይ የዋለው ዘዴ ፒኤች 8.6 ሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ነው.

በሳይቶፕላዝም ውስጥ ኤቲሊን ግላይኮል ቡድኖች (CHOH-CHOH) በ glycogen ወይም polysaccharides (እንደ mucopolysaccharides, mucoproteins, glycoproteins, glycoproteins, glycolipids, ወዘተ) ውስጥ የሚገኙት ኤቲሊን ግላይኮል ቡድኖች (CHOH-CHOH) በየጊዜው አሲድ ኦክሳይድ እና ወደ አልዲኢይድ ቡድኖች (CHO-CHO) ይለወጣሉ. እነዚህ የአልዲኢድ ቡድኖች ቀለም ከሌለው ሐምራዊ-ቀይ ሽፍ ሬጀንት ጋር በማዋሃድ በሴል ውስጥ ፖሊሶክካርዳይድ በሚገኝበት ቦታ ላይ የሚከማች ወይን ጠጅ-ቀይ ቀለም ይፈጥራሉ። ይህ ምላሽ ወቅታዊ አሲድ-ሺፍ (PAS) ማቅለሚያ በመባል ይታወቃል፣ ቀደም ሲል የ glycogen ቀለም ይባላል።

የሙከራ ዘዴ

ቁሶች፡-ሴሉሎስ አሲቴትሜምብሬን, ኤሌክትሮፊዮራይዝስ መሳሪያ(DYCP-38C እና የኃይል አቅርቦት DYY-6C), የላቀ የናሙና መጫኛ መሳሪያ(pipette), ስፔክትሮፕቶሜትር, ባለቀለም ኩቬትስ, ቋት.

መያዣ፡

(1) pH 8.6 TEB Buffer፡ 10.29 g Tris፣ 0.6 g EDTA፣ 3.2 g boric acid፣ እና የተጣራ ውሃ ወደ 1000 ሚሊ ጨምሩ።

(2) Borate Buffer፡ 6.87 ግ ቦራክስ እና 5.56 ግ ቦሪ አሲድ ይመዝናሉ እና የተጣራ ውሃ ወደ 1000 ሚሊር ይጨምሩ።

ሂደት፡-

Pየሂሞግሎቢን መፍትሄን ማስተካከል

ሄፓሪን ወይም ሶዲየም ሲትሬትን የያዘው 3 ሚሊር ደም እንደ ፀረ-coagulant ይውሰዱ። ለ 10 ደቂቃዎች በ 2000 ሩብ / ደቂቃ ሴንትሪፉጅ እና ፕላዝማውን ያስወግዱ. ቀይ የደም ሴሎችን ሶስት ጊዜ በፊዚዮሎጂካል ሳላይን (750 rpm, 5 minutes centrifugation በእያንዳንዱ ጊዜ) ያጠቡ. ለ 10 ደቂቃዎች በ 2200 ሩብ / ደቂቃ ሴንትሪፉጅ እና ከፍተኛውን ያስወግዱ. በእኩል መጠን የተጣራ ውሃ ይጨምሩ, ከዚያም የካርቦን ቴትራክሎራይድ መጠን 0.5 እጥፍ ይጨምሩ. ለ 5 ደቂቃዎች በብርቱ ይንቀጠቀጡ እና ከዚያም በ 2200 rpm ሴንትሪፉፍ ለ 10 ደቂቃዎች የላይኛው የ Hb መፍትሄ ለመሰብሰብ.

Membraneን ማጥለቅለቅ

የሴሉሎስ አሲቴት ሽፋንን በ 3 ሴ.ሜ × 8 ሴ.ሜ የሚለኩ ቁርጥራጮች ይቁረጡ. ሙሉ በሙሉ እስኪሞሉ ድረስ በ pH 8.6 TEB ቋት ውስጥ ያድርጓቸው፣ ከዚያም ያስወግዱት እና በማጣሪያ ወረቀት ያጥፉት።

ስፖት ማድረግ

10 μl የሂሞግሎቢን መፍትሄ በአቀባዊ ወደ ሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን (ሸካራ ጎኑ) ከጫፉ 1.5 ሴ.ሜ ርቀት ላይ ለመለየት ፒፔት ይጠቀሙ።

ኤሌክትሮፊዮራይዝስ

የቦረቴ ቋት መፍትሄ ወደ ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ክፍል ውስጥ አፍስሱ። የሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ከቦታው ጎን በካቶድ ጫፍ ላይ ያስቀምጡት. በ 200 ቮ ለ 30 ደቂቃዎች ያሂዱ.

ኢሉሽን

የ HbA እና HbA2 ዞኖችን ይቁረጡ, በተለየ የሙከራ ቱቦዎች ውስጥ ያስቀምጧቸው እና 15 ml እና 3 ሚሊ ሜትር የተጣራ ውሃ ይጨምሩ. ሄሞግሎቢንን ሙሉ በሙሉ ለማስወገድ በቀስታ ይንቀጠቀጡ እና ከዚያ ይቀላቅሉ.

ኮሎሪሜትሪ

ለኤሌትዩሽን መፍትሄ የተጣራ ውሃ በመጠቀም መምጠጥን ዜሮ ማድረግ እና መምጠጥን በ 415 nm ይለካሉ.

ስሌት

HbA2(%) = HbA2 tube / (HbA tube × 5 + የ HbA2 ቱቦ መምጠጥ) × 100%

የሙከራ ውጤቶች ስሌት

የማጣቀሻ ክልል ለ pH 8.6 TEB Buffer ሴሉሎስ አሲቴት ኤሌክትሮፊዮሬሲስ፡ HbA > 95%፣ HbA2 1%-3.1%

ማስታወሻዎች

ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ጊዜ በጣም ረጅም መሆን የለበትም. በኤሌክትሮፊዮሬሲስ ወቅት የሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን መድረቅ የለበትም. HbA እና HbA2 በግልጽ ሲለያዩ ኤሌክትሮፊሸሮችን ያቁሙ። ረዥም ኤሌክትሮፊዮራይዝስ የባንድ ስርጭትን እና ብዥታን ሊያስከትል ይችላል.

በጣም ብዙ ናሙና ከመጠቀም ይቆጠቡ. ከመጠን በላይ የሆነ የሂሞግሎቢን ፈሳሽ ወደ ባንድ መገለል ወይም በቂ ያልሆነ ማቅለሚያ ሊያስከትል ይችላል, በዚህም ምክንያት የውሸት የ HbA መጠን ይጨምራል.

የሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ከፕሮቲኖች ጋር እንዳይበከል ይከላከሉ.

የአሁኑ በጣም ከፍተኛ መሆን የለበትም; አለበለዚያ የሂሞግሎቢን ባንዶች ሊለያዩ አይችሉም.

ሁልጊዜ ከተለመዱ ግለሰቦች የተውጣጡ ናሙናዎችን እና አስፈላጊ የሆኑትን ያልተለመዱ ሄሞግሎቢኖችን እንደ መቆጣጠሪያዎች ያካትቱ.

ቤጂንግ ሊዩ ባዮቴክኖሎጂ ሞዴል የሆነውን የሂሞግሎቢን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ፕሮፌሽናል ኤሌክትሮፊሸርስ ታንክን ያመርታልDYCP-38Cሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝ ታንክ ፣ እና ለሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝ ታንክ ሁለት የኤሌክትሮፎረሲስ የኃይል አቅርቦት ሞዴሎች አሉ።dyY-2CእናdyY-6Cየኃይል አቅርቦት.

ይህ በእንዲህ እንዳለ ቤጂንግ ሊዩ ባዮቴክኖሎጂ ለደንበኞች ሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ይሰጣል ፣ እና የሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን መጠን ሊበጅ ይችላል። ለናሙናዎች እና ለበለጠ መረጃ እኛን ለመጠየቅ እንኳን ደህና መጡ።

የቤጂንግ ሊዩ ብራንድ በቻይና ውስጥ ከ 50 ዓመታት በላይ ታሪክ ያለው እና ኩባንያው የተረጋጋ እና ከፍተኛ ጥራት ያላቸውን ምርቶች በዓለም ዙሪያ ሊያቀርብ ይችላል። በዕድገት ዓመታት ውስጥ, ለእርስዎ ምርጫ ብቁ ነው!

አሁን አጋሮችን እየፈለግን ነው, ሁለቱም የኦሪጂናል ዕቃ አምራች ኤሌክትሮፊሸሮች ታንክ እና አከፋፋዮች እንኳን ደህና መጡ.

ለምርቶቻችን ማንኛውም የግዢ እቅድ ካለዎት እባክዎ እኛን ለማነጋገር አያመንቱ። በኢሜል መልእክት ሊልኩልን ይችላሉ።[ኢሜል የተጠበቀ]ወይም[ኢሜል የተጠበቀ]ወይም እባክዎን በ +86 15810650221 ይደውሉልን ወይም WhatsApp +86 15810650221 ይጨምሩ ወይም Wechat: 15810650221