ሴሉሎስ አሲቴት ሜምብራል ኤሌክትሮፊዮራይዝስን ለመጠቀም ባለፈው ሳምንት ብዙ ሃሳቦችን አካፍለናል፣ እና ይህን ርዕስ ለማጣቀሻ ዛሬ እዚህ እንጨርሰዋለን።
ምርጫ ቋት ማጎሪያ
በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ጥቅም ላይ የዋለው የመጠባበቂያ ክምችት በአጠቃላይ በወረቀት ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ጥቅም ላይ ከዋለ ያነሰ ነው. በብዛት ጥቅም ላይ የዋለው pH 8.6Bየግልግል ቋት በተለምዶ ከ 0.05 ሞል/ሊ እስከ 0.09 ሞል/ሊ ክልል ውስጥ ይመረጣል። ትኩረትን በሚመርጡበት ጊዜ, የመጀመሪያ ደረጃ ውሳኔ ይደረጋል. ለምሳሌ, በኤሌክትሮፊዮሬሲስ ክፍል ውስጥ ባሉ ኤሌክትሮዶች መካከል ያለው የሜምፕል ስትሪፕ ርዝመት 8-10 ሴ.ሜ ከሆነ, የ 25V ቮልቴጅ በሴንቲሜትር ሽፋን ርዝመት ያስፈልጋል, እና የአሁኑ ጥንካሬ በሴንቲሜትር ሽፋን ስፋት 0.4-0.5 mA መሆን አለበት. በኤሌክትሮፊዮሬሲስ ጊዜ እነዚህ እሴቶች ካልተሳኩ ወይም ካለፉ, የመጠባበቂያ ክምችት መጨመር ወይም መጨመር አለበት.
ከመጠን በላይ ዝቅተኛ የመጠባበቂያ ክምችት የባንዶች ፈጣን እንቅስቃሴ እና የባንድ ስፋት መጨመር ያስከትላል. በሌላ በኩል፣ ከመጠን በላይ ከፍ ያለ የመጠባበቂያ ክምችት የባንድ ፍልሰትን ይቀንሳል፣ ይህም የተወሰኑ የመለያያ ባንዶችን ለመለየት አስቸጋሪ ያደርገዋል።
በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ከፍተኛ መጠን ያለው ሙቀት በሚያመነጨው ናሙና አማካኝነት የአሁኑን ጉልህ ክፍል እንደሚካሄድ ልብ ሊባል ይገባል. አንዳንድ ጊዜ፣ የተመረጠው ቋት ትኩረት እንደ ተገቢ ተደርጎ ሊወሰድ ይችላል። ነገር ግን የአካባቢ ሙቀት መጨመር ወይም ከፍተኛ ቮልቴጅን በሚጠቀሙበት ጊዜ በሙቀቱ ምክንያት የውሃ ትነት ሊጠናከር ይችላል, በዚህም ምክንያት ከመጠን በላይ ከፍ ያለ የመጠባበቂያ ክምችት እና ሽፋኑ እንዲደርቅ ያደርጋል.
የናሙና መጠን
በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ የናሙና መጠኑ በተለያዩ ምክንያቶች ይወሰናል, የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ሁኔታዎች, የናሙናው ራሱ ባህሪያት, የማቅለሚያ ዘዴዎች እና የመለየት ዘዴዎች. እንደ አጠቃላይ መርህ ፣ የመለየት ዘዴው የበለጠ ስሱ ፣ የናሙና መጠኑ አነስተኛ ሊሆን ይችላል ፣ ይህም ለመለያየት ጠቃሚ ነው። የናሙና መጠኑ ከመጠን በላይ ከሆነ, የኤሌክትሮፊዮቲክ መለያየት ንድፎች ግልጽ ላይሆኑ ይችላሉ, እና ማቅለም ጊዜ የሚወስድ ነው. ነገር ግን ኤሊዩሽን ኮሪሚሜትሪክ የፍተሻ ዘዴዎችን በመጠቀም የተለያየ ቀለም ያላቸው ባንዶችን በቁጥር ሲተነተን፣ የናሙና መጠኑ በጣም ትንሽ መሆን የለበትም፣ ምክንያቱም ለተወሰኑ ክፍሎች የመምጠጥ ዋጋን ስለሚያስከትል ይዘታቸውን በማስላት ላይ ከፍተኛ ስህተቶችን ያስከትላል። በእንደዚህ ዓይነት ሁኔታዎች ውስጥ የናሙና መጠኑ በትክክል መጨመር አለበት.
በተለምዶ በእያንዳንዱ ሴንቲሜትር የናሙና አፕሊኬሽን መስመር ላይ የተጨመረው የናሙና መጠን ከ 0.1 እስከ 5 μL, ከ 5 እስከ 1000 μg ናሙና መጠን ጋር እኩል ነው. ለምሳሌ በተለመደው የሴረም ፕሮቲን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ትንተና በእያንዳንዱ ሴንቲ ሜትር የአፕሊኬሽን መስመር ላይ የተጨመረው የናሙና መጠን በአጠቃላይ ከ 1 μL አይበልጥም, ይህም ከ 60 እስከ 80 μg ፕሮቲን ነው. ነገር ግን ተመሳሳይ ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ዘዴን በመጠቀም የሊፕቶፕሮቲኖችን ወይም glycoproteinsን ሲተነትኑ የናሙናውን መጠን በተመሳሳይ መልኩ መጨመር ያስፈልገዋል።
በማጠቃለያው, በተከታታይ የመጀመሪያ ሙከራዎች በተወሰኑ ሁኔታዎች ላይ በመመርኮዝ በጣም ተስማሚ የሆነ የናሙና መጠን መመረጥ አለበት.
የእድፍ መፍትሄ ምርጫ
በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ ያሉት የተነጣጠሉ ባንዶች ከመለየታቸው በፊት በተለምዶ ቀለም የተቀቡ ናቸው። የተለያዩ የናሙና ክፍሎች የተለያዩ የማቅለም ዘዴዎችን ይጠይቃሉ, እና ለሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ተስማሚ የሆኑ የማቅለሚያ ዘዴዎች ወረቀትን ለማጣራት ሙሉ በሙሉ ላይሆን ይችላል.
የቀለም መፍትሄን ለመምረጥ ሶስት ዋና መርሆዎች አሉሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን. በመጀመሪያ፣በውሃ የሚሟሟ ማቅለሚያዎች በኋለኛው ማቅለሚያ መፍትሄ ምክንያት የሚከሰተውን የሽፋን መቀነስ እና መበላሸትን ለማስወገድ በአልኮል ከሚሟሟ ማቅለሚያዎች የበለጠ ተመራጭ መሆን አለባቸው። ከቆሸሸ በኋላ ሽፋኑን በውሃ ማጠብ እና የቆይታ ጊዜን መቀነስ አስፈላጊ ነው. ያለበለዚያ ሽፋኑ ሊገለበጥ ወይም ሊጨማደድ ይችላል፣ ይህም በቀጣይ ማወቂያ ላይ ተጽዕኖ ይኖረዋል።
በሁለተኛ ደረጃ, ለናሙናው በጠንካራ ነጠብጣብ ቅርበት ያላቸው ቀለሞችን መምረጥ ይመረጣል. በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን የሴረም ፕሮቲኖች ውስጥ፣ አሚኖ ጥቁር 10ቢ በተለምዶ ጥቅም ላይ የሚውለው ለተለያዩ የሴረም ፕሮቲን ክፍሎች ባለው ጠንካራ የእድፍ ቅርበት እና መረጋጋት ስላለው ነው።
በሶስተኛ ደረጃ, አስተማማኝ ጥራት ያላቸው ማቅለሚያዎች መምረጥ አለባቸው. አንዳንድ ማቅለሚያዎች፣ ተመሳሳይ ስም ቢኖራቸውም፣ ከቆሸሸ በኋላ በተለይ ጥቁር ዳራ የሚያስከትሉ ቆሻሻዎችን ሊይዝ ይችላል። ይህ በመጀመሪያ በደንብ የተለዩትን ባንዶች እንኳን ሊያደበዝዝ ይችላል, ይህም ለመለየት አስቸጋሪ ያደርገዋል.
በመጨረሻም, የቀለም መፍትሄ ትኩረትን መምረጥ አስፈላጊ ነው. በንድፈ ሀሳቡ፣ ከፍተኛ የቀለም መፍትሄ ትኩረት ወደ የናሙና ክፍሎች የበለጠ በደንብ ወደ ማቅለም እና የተሻለ የመርከስ ውጤት እንደሚያመጣ ሊመስል ይችላል። ሆኖም ግን, ይህ አይደለም. በናሙና ክፍሎች እና በቀለም መካከል ያለው ትስስር የተወሰነ ገደብ አለው, ይህም በቆሻሻ መፍትሄ ክምችት መጨመር አይጨምርም. በተቃራኒው, ከመጠን በላይ ከፍተኛ የሆነ የማቅለሚያ መፍትሄ ትኩረትን ማቅለሚያውን ማባከን ብቻ ሳይሆን ግልጽ የሆነ ዳራ ለመድረስ አስቸጋሪ ያደርገዋል. ከዚህም በላይ የቀለም ጥንካሬ የተወሰነ ከፍተኛ እሴት ላይ ሲደርስ, ቀለም የመምጠጥ ጥምዝ መስመራዊ ግንኙነትን አይከተልም, በተለይም በቁጥር መለኪያዎች.በሴሉሎስ አሲቴት ሽፋን ኤሌክትሮፊዮራይዝስ ውስጥ, የቀለም መፍትሄ ትኩረት በአጠቃላይ በወረቀት ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ውስጥ ጥቅም ላይ ከዋለ ያነሰ ነው.
ስለ ቤጂንግ ሊዩይ ባዮቴክኖሎጂ ለማወቅ ዝርዝሮች's ሴሉሎስ አሲቴት ሽፋንኤሌክትሮፊዮራይዝስ ታንክ እና የኤሌክትሮፊዮሬሲስ አፕሊኬሽኑ፣ እባክዎን እዚህ ይጎብኙ፡-
ኤልየሴረም ፕሮቲን በሴሉሎስ አሲቴት ሜምብራን የመለየት ሙከራ
ኤልሴሉሎስ አሲቴት ሜምብራን ኤሌክትሮፊዮሬሲስ (1) ሲጠቀሙ ብዙ ግምት ውስጥ መግባት አለባቸው.
ለምርቶቻችን ማንኛውም የግዢ እቅድ ካለዎት እባክዎ እኛን ለማነጋገር አያመንቱ። በኢሜል መልእክት ሊልኩልን ይችላሉ።[ኢሜል የተጠበቀ]ወይም[ኢሜል የተጠበቀ]ወይም እባክዎን በ +86 15810650221 ይደውሉልን ወይም WhatsApp +86 15810650221 ወይም Wechat: 15810650221 ይጨምሩ።
ዋቢ፡Electrophoresis (ሁለተኛ እትም) በአቶ ሊ
የልጥፍ ሰዓት፡- ሰኔ-06-2023