ፖሊacrylamide gel electrophoresis ምንድነው?

ፖሊacrylamide Gel Electrophoresis

ጄል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ እንደ ዲ ኤን ኤ ፣ አር ኤን ኤ እና ፕሮቲኖች ያሉ ማክሮ ሞለኪውሎችን ለመለያየት በባዮሎጂካል ዘርፎች ውስጥ ባሉ ላቦራቶሪዎች ውስጥ መሠረታዊ ዘዴ ነው።የተለያዩ የመለያያ ሚዲያዎች እና ስልቶች የእነዚህ ሞለኪውሎች ንዑስ ስብስቦች አካላዊ ባህሪያቸውን በመጠቀም በብቃት እንዲለያዩ ያስችላቸዋል።በተለይ ለፕሮቲኖች, ፖሊacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ብዙውን ጊዜ የሚመርጠው ዘዴ ነው.

PAGE እንደ ፕሮቲን ያሉ ማክሮ ሞለኪውሎችን በኤሌክትሮ ፎረቲክ ተንቀሳቃሽነት ላይ በመመስረት የሚለይ ቴክኒክ ነው፣ ማለትም ተንታኞች ወደ ተቃራኒው ቻርጅ ወደ ኤሌክትሮል የመንቀሳቀስ ችሎታ።በ PAGE, ይህ የሚወሰነው በሞለኪውል ክፍያ, መጠን (ሞለኪውል ክብደት) እና ቅርፅ ነው.ተንታኞች በ polyacrylamide gel ውስጥ በተፈጠሩ ቀዳዳዎች ውስጥ ይንቀሳቀሳሉ.እንደ ዲ ኤን ኤ እና አር ኤን ኤ ሳይሆን፣ ፕሮቲኖች እንደ አሚኖ አሲዶች በተካተቱት መጠን ይለያያሉ፣ ይህም እንዴት እንደሚሮጡ ላይ ተጽእኖ ያሳድራል።የአሚኖ አሲድ ሕብረቁምፊዎች በግልጽ መጠናቸው እና በዚህም ምክንያት በቀዳዳዎቹ ውስጥ እንዴት መንቀሳቀስ እንደሚችሉ ላይ ተጽእኖ የሚያሳድሩ ሁለተኛ ደረጃ መዋቅሮችን ሊፈጥሩ ይችላሉ።ስለዚህ አንዳንድ ጊዜ የበለጠ ትክክለኛ የመጠን ግምት ካስፈለገ ከኤሌክትሮፊዮራይዝስ በፊት ፕሮቲኖችን መስመሩን እንዲያደርጉ ሊፈለግ ይችላል።

የኤስዲኤስ ገጽ

ሶዲየም-ዶዴሲል ሰልፌት ፖሊacrylamide gel electrophoresis ከ 5 እስከ 250 ኪ.ሜ የጅምላ የፕሮቲን ሞለኪውሎችን ለመለየት የሚያገለግል ዘዴ ነው።ፕሮቲኖች የሚለያዩት በሞለኪውላዊ ክብደታቸው ላይ ብቻ ነው።ሶዲየም ዶዴሲል ሰልፌት ፣ አኒዮኒክ ሰርፋክታንት ፣ የፕሮቲን ናሙናዎችን ውስጣዊ ክፍያዎችን የሚሸፍን እና ከጅምላ ሬሾ ጋር ተመሳሳይ የሆነ ክፍያ በሚሰጥ ጄል ዝግጅት ውስጥ ይጨመራል።በቀላል ቃላት ፕሮቲኖችን ያስወግዳል እና አሉታዊ ክፍያ ይሰጣቸዋል።

ቤተኛ PAGE

Native PAGE ፕሮቲኖችን ለመለየት denatured ያልሆኑ ጄልዎችን የሚጠቀም ዘዴ ነው።እንደ SDS PAGE ሳይሆን፣ በጄል ዝግጅት ላይ ምንም አይነት የማስወገጃ ወኪል አይጨመርም።በዚህ ምክንያት የፕሮቲኖች መለያየት የሚከናወነው በፕሮቲኖች ክፍያ እና መጠን ላይ በመመርኮዝ ነው።በዚህ ቴክኒክ ውስጥ የፕሮቲኖች መገጣጠም ፣ ማጠፍ እና የአሚኖ አሲድ ሰንሰለቶች መለያየቱ ላይ የሚመረኮዝባቸው ምክንያቶች ናቸው።በዚህ ሂደት ውስጥ ፕሮቲኖች አልተጎዱም, እና መለያየት ከተጠናቀቀ በኋላ መልሶ ማግኘት ይቻላል.

ፖሊacrylamide gel electrophoresis (PAGE) እንዴት ይሠራል?

የ PAGE መሰረታዊ መርህ የኤሌክትሪክ ፍሰትን በመጠቀም በ polyacrylamide gel ቀዳዳዎች ውስጥ በማለፍ ትንታኔዎችን መለየት ነው.ይህንን ለማግኘት, acrylamide-bisacrylamide ድብልቅ በአሞኒየም ፐርሰልፌት (ኤፒኤስ) በመጨመር ፖሊሜራይዝድ (polyacrylamide) ነው.በ tetramethylethylenediamine (TEMED) የሚመረመረው ምላሽ ተንታኞች የሚንቀሳቀሱበት ቀዳዳዎች ያሉት መረብ መሰል መዋቅር ይፈጥራል (ምስል 2)።በጄል ውስጥ የተካተተው የጠቅላላ acrylamide መቶኛ ከፍ ባለ መጠን የቀዳዳው መጠን አነስተኛ ነው, ስለዚህም ትንሽ ፕሮቲኖች ማለፍ ይችላሉ.የአክሪላሚድ እና ቢስክሪላሚድ ሬሾ እንዲሁ በቀዳዳው መጠን ላይ ተጽዕኖ ይኖረዋል ነገር ግን ይህ ብዙውን ጊዜ በቋሚነት ይቆያል።ትናንሽ የቀዳዳዎች መጠኖች ትናንሽ ፕሮቲኖች በጄል ውስጥ የሚዘዋወሩበትን ፍጥነት ይቀንሳሉ ፣ ጥራታቸውን ያሻሽላሉ እና አሁኑን በሚተገበርበት ጊዜ በፍጥነት ወደ ቋት ውስጥ እንዳይገቡ ይከላከላል።

ለፖሊacrylamide Gel Electrophoresis መሳሪያዎች

ጄል ኤሌክትሮፎረሲስ ሕዋስ (ታንክ/ቻምበር)
የጄል ታንክ ለ polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) ከአጋሮዝ ጄል ታንክ የተለየ ነው.የአጋሮዝ ጄል ታንክ አግድም ነው, የ PAGE ታንክ ደግሞ ቀጥ ያለ ነው.በአቀባዊ ኤሌክትሮፎረሲስ ሴል (ታንክ/ቻምበር) ቀጭን ጄል (በተለምዶ 1.0ሚሜ ወይም 1.5ሚሜ) በሁለት ብርጭቆ ሳህኖች መካከል ይፈስሳል እና ይጫናል የጄል የታችኛው ክፍል በአንድ ክፍል ውስጥ ቋት ውስጥ እንዲገባ እና ከላይ ወደ ቋት ውስጥ እንዲገባ ይደረጋል። በሌላ ክፍል ውስጥ.ጅረት ሲተገበር ትንሽ መጠን ያለው ቋት በጄል በኩል ከላይኛው ክፍል ወደ ታችኛው ክፍል ይፈልሳል።ስብሰባው ቀጥ ያለ ቦታ ላይ እንደሚቆይ ለማረጋገጥ በጠንካራ ማያያዣዎች አማካኝነት መሳሪያው ፈጣን የጄል ሩጫዎችን እንኳን በማቀዝቀዝ የተለያዩ ባንዶችን ያስገኛል ።

ቤጂንግ ሊዩ ባዮቴክኖሎጂ Co., Ltd.ሞዴሎች DYCZ-20C እና DYCZ-20G ለዲኤንኤ ቅደም ተከተል ትንተና ቁመታዊ ኤሌክትሮፊዮሬሲስ ሴሎች (ታንኮች/ቻምበር) ናቸው።አንዳንድ ቀጥ ያሉ የኤሌክትሮፊዮሬሲስ ሴሎች (ታንኮች/ቻምበር) ከብሎቲንግ ሲስተም ጋር ተኳሃኝ ናቸው፣ እንደ ሞዴል DYCZ-24DN፣ DYCZ-25D እና DYCZ-25E ከምእራብ ብሉቲንግ ሲስተም ሞዴል DYCZ-40D፣ DYCZ-40G እና DYCZ-40F ጋር ተኳሃኝ ናቸው። የፕሮቲን ሞለኪውልን ከጄል ወደ ሽፋን ለማስተላለፍ የሚያገለግሉ።ከኤስዲኤስ-ገጽ ኤሌክትሮፊዮርስስ በኋላ፣ ዌስተርን ብሉቲንግ በፕሮቲን ድብልቅ ውስጥ የተወሰነ ፕሮቲንን የመለየት ዘዴ ነው።በሙከራ መስፈርቶች መሰረት እነዚህን የመጥፋት ስርዓቶች መምረጥ ይችላሉ.

ኤሌክትሮፊዮራይዝስ የኃይል አቅርቦት
ጄል ለማስኬድ ኤሌክትሪክን ለማቅረብ የኤሌክትሮፊዮሬሲስ የኃይል አቅርቦት ያስፈልግዎታል.በሊዩ ባዮቴክኖሎጂ ለሁሉም አፕሊኬሽኖች የተለያዩ የኤሌክትሮፎረሲስ የኃይል አቅርቦቶችን እናቀርባለን።ሞዴሉ DYY-12 እና DYY-12C ከፍተኛ የተረጋጋ ቮልቴጅ እና የአሁኑ ከፍተኛ የቮልቴጅ ፍላጎት ኤሌክትሮፊዮሬሲስን ሊያሟላ ይችላል.የመቆሚያ፣ የጊዜ፣ የቪኤች እና የደረጃ በደረጃ መተግበሪያ ተግባር አለው።ለአይኢኤፍ እና ለዲኤንኤ ቅደም ተከተል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ መተግበሪያ ተስማሚ ናቸው.ለአጠቃላይ ፕሮቲን እና ለዲኤንኤ ኤሌክትሮፊዮራይዝስ አፕሊኬሽን ሞዴል DYY-2C፣ DYY-6C፣ DYY-10 እና የመሳሰሉት አሉን እነዚህም ሞቃታማ የሽያጭ ሃይል አቅርቦት ከኤሌክትሮፎረሲስ ሴሎች (ታንኮች/ቻምበር) ጋር።እነዚህ ለመካከለኛ እና ዝቅተኛ የቮልቴጅ ኤሌክትሮፊክስ አፕሊኬሽኖች ለምሳሌ ለት / ቤት ላብራቶሪ አጠቃቀም, ለሆስፒታል ላብራቶሪ እና የመሳሰሉትን መጠቀም ይቻላል.ለኃይል አቅርቦቶች ተጨማሪ ሞዴሎች፣ እባክዎን ድህረ ገጻችንን ይጎብኙ።

የሊዩ ብራንድ በቻይና ውስጥ ከ 50 ዓመታት በላይ ታሪክ ያለው እና ኩባንያው የተረጋጋ እና ከፍተኛ ጥራት ያላቸውን ምርቶች በዓለም ዙሪያ ሊያቀርብ ይችላል።በዓመታት እድገት ፣ ለእርስዎ ምርጫ ብቁ ነው!

ስለእኛ ተጨማሪ መረጃ እባክዎን በኢሜል ያግኙን።[ኢሜል የተጠበቀ] or [ኢሜል የተጠበቀ].

ማጣቀሻዎች ፖሊacrylamide gel electrophoresis ምንድን ነው?
1. ካረን ስቱዋርድ ፒኤችዲ ፖሊacrylamide gel electrophoresis፣ እንዴት እንደሚሰራ፣ ቴክኒክ ልዩነቶች እና አፕሊኬሽኖቹ